TESTE VP (Voges-Proskauer) e VM (Vermelho-de-Metila)
O meio básico é produzido por vários fabricantes. Obedece a fórmula abaixo:
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Peptona ...................................... 7,0g Fosfato dibásico de Potássio ...... 5,0g Glicose ..................................... 5,0g Água destilada ....................... 1000ml |
PH ± 6,9. Distribuir volumes de 3ml em tubos 13 x 100mm. Esterilizar a 115°C, por 15 minutos ou a 120°C por10 minutos. O meio deve mostrar-se quase incolor. |
Após inoculado, incubar a 37°C, por 48 horas, ou à temperatura ambiente (+ 30°C), por 96 horas. O nóculo abundante e a temperatura mais baixa favorecem a positividade do teste, particularmente para Hafnia e Proteus mirabilis.
Para leitura, juntar para cada mililitro de cultura o reativo de Barritt:
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Solução de alta-naftol a 5% em álcool absoluto ........ 0,6ml Solução aquosa de KOH a 40% ............................... 0,2ml |
Como alternativa mais conveniente para rotina, juntar para cada mililitro de meio partes iguais ( + 0,5ml) de:
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Solução de alfa-naftol a 6% em álcool absoluto ............... 0,5 ml Solução aquosa de KOH a 16% ....................................... 0,5ml |
Agitar bem e observar o desenvolvimento de coloração de rosa a vinho, intensa, em 15 minutos. Coloração parda deve ser desprezada.
Reação do VM:
A 5cm3 da cultura em meio básico adicionar 5 gotas de uma solução hidroalcoólica de vermelho-de-metila.
- Solução de Vermelho-de-Metila
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Vermelho-de-metila .............. 0,1 ml Álcool-de-metila .................. 300 ml Água destilada ..................... 500 ml |